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编号:10279096
大鼠垂体前叶内SP-免疫阳性神经纤维与其周围组织结构中的神经纤维的关系
http://www.100md.com 《解剖学报》 1998年第1期
     作者:王 键 鞠 躬

    单位:第四军医大学全军神经科学研究所形态学研究室,西安 710032

    关键词:垂体;垂体前叶;神经支配;P物质;大鼠

    解剖学报980107

     用周围组织结构完整的大鼠垂体的连续切片,结合免疫组织化学方法,分

    析大鼠垂体前叶内SP-免疫阳性神经纤维与其周围组织结构中的SP-免疫阳性神经纤维

    的关系。结果显示:垂体前叶的周围脑膜中有着大量的SP-免疫阳性神经纤维和纤维

    束,并发出分支,进入垂体前叶内部。同时在垂体两侧的动、静脉壁上亦有着大量的
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    SP-免疫阳性神经纤维及纤维束,与走行在前叶表面的SP-免疫阳性神经纤维束相连。

    此外,在垂体柄腹侧的门静脉壁上有大量的SP-免疫阳性神经纤维束与垂体前、后叶

    吻侧血管旁的SP-免疫阳性神经纤维或纤维束相连。

    近来我们在哺乳动物垂体前叶内发现存在若干种肽能神经纤维,有的数量还较

    多[14]。在我们之前未引起人们的注意。从光镜研究中发现这些肽能神经纤维多集

    中在垂体前叶的腺细胞之间而且双标显示这些纤维可和前叶中的多种腺细胞有较密

    切的接触[4]。电镜研究证明:在狗垂体前叶中SP、CGRP-免疫阳性神经纤维可和前
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    叶中的促肾上腺皮质激素和生长激素细胞形成突触[4,5]。而在大鼠垂体前叶中SP-免

    疫阳性神经纤维主要和催乳素细胞形成突触[6]。切除大鼠肾上腺,改变机体内分泌

    状态几天后,垂体前叶中的CGRP-和GAP-43-免疫阳性神经纤维都有了很显著的增

    加[7,8]。据此鞠躬[4,7]等提出了哺乳动物垂体前叶的神经-体液的双重调节假说。以往

    的研究多是孤立的研究垂体前叶内的肽能神经纤维,而哺乳动物垂体前叶中的肽能

    神经纤维的来源并不清楚,并且我们在研究大鼠垂体前叶肽能神经纤维时也发现垂

    体前叶周围有许多神经纤维可进入垂体前叶。因此本实验在取材时保持垂体前叶及
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    周围组织结构的完整,并采取连续切片的办法,目的是对大鼠垂体前叶内的SP-免疫

    阳性神经纤维与周围组织结构中的SP-免疫阳性神经纤维的关系作一研究,以希望能

    对大鼠垂体前叶的神经纤维的来源和肽能纤维进入垂体前叶的可能的路径提供一些

    线索。

    材料和方法

    SD成年雄性大鼠6只,体重250g±10g,1%戊巴比妥钠2ml腹腔麻醉后,主动脉灌生

    理盐水150ml,然后用4℃,4%多聚甲醛PB液400ml持续固定1.5h后,取材,注意保持

    垂体周围脑膜血管完整及垂体柄与下丘脑的连续。将组织浸入20%蔗糖液中,4℃过
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    夜。经恒冷箱连续切片,(厚20μm)。3只大鼠垂体采用矢状切面,2只采用冠状切面,1只采用水平切面。将切片置于1∶5 000的抗P物质血清中(新西兰Watpa公司赠送)。于

    室温下24h,经ABC法后,用葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵法呈色。对照实验用无关

    的抗OXY抗体在1∶5 000的稀释度下替代SP抗体进行免疫染色。无关抗体对照的理由

    见参考文献[1]。用10-6mol/L合成的P物质(CambridgeResearch Biochemical),吸收SP抗

    体后再进行免疫染色。替代实验及吸收实验结果:大鼠垂体前叶内未见阳性结果。

    结 果

    1.大鼠垂体中间叶仅可见到几根SP-免疫阳性神经纤维,走行在中间叶的腺细胞团
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    之间。而垂体后叶却满布SP-免疫阳性神经纤维。没有见到前叶与后叶、中间叶之间的

    SP-免疫阳性神经纤维之间的联系。

    2.在垂体的矢状切面上,前叶腺体表面与软脑膜之间有大量的SP-免疫阳性神经纤

    维和神经纤维束,沿吻-尾方向走行,并且能深入腺体内分成许多细支。在前叶吻侧,除脑膜上存在SP-免疫阳性神经纤维束外,还有许多神经纤维束附着前叶内的血管壁上

    (图1)。

    在垂体的冠状切面上,可见到垂体前叶吻侧和尾侧端SP-免疫阳性神经纤维束在垂

    体前叶中横行,纤维束较长(图2,3);而在垂体中段,则SP-免疫阳性神经纤维束分布
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    于两翼边缘的脑膜上,纤维束较短。可见神经纤维束发出神经纤维进入到前叶中去。

    在水平切面上,可见垂体前叶最腹侧的切片上,有许多条长的SP-免疫阳性神经纤

    维和纤维束呈吻尾方向走行且相互平行,但其中也有短的,斜行的神经纤维和纤维束

    (图4)。

    3.在垂体尾侧端冠状切面上,颈内动脉位于垂体的下方,硬脑膜外;而海绵窦在

    此处却紧贴于垂体前叶两旁(图5A)。海绵窦紧贴垂体前叶这一侧的窦壁上有大量的SP-

    免疫阳性神经纤维束(图6),与横行于垂体前叶后端中的SP-免疫阳性纤维束相延续。而

    此时位于前叶下方颈内动脉壁上却没有见到SP-免疫阳性神经纤维。但在靠近吻侧的冠
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    状切面上,颈内动脉位于垂体前叶两侧并与之相贴(图5B)。此时垂体位于动脉内侧,而

    动脉其余周边却被海绵窦占据。此处动脉(图7)、静脉壁上均可见到SP-免疫阳性的神经

    纤维,但它们却不是成束存在的,而此处海绵窦壁中的SP-免疫阳性神经纤维却是成束

    存在。

    另外,在垂体四周的脑膜中间,有一些沟通左、右海绵窦的小静脉,其血管壁上

    有许多SP-免疫阳性神经纤维,呈放射状,或沿脑膜走行,或进入垂体前叶(图8)。

    4. 在矢状切面上,可以清楚地看到下丘脑通过正中隆起与垂体后叶相延续。在正

    中隆起至垂体柄这一段腹侧的门脉血管壁上有许多SP-免疫阳性神经纤维束(图1)。这
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    些血管位于正中隆起和垂体柄的外层,是一些较粗大的血管。它与垂体前叶正中粗大

    的门脉血管和后叶的血管相吻合。从连续切片的模式图上(图9),可以清楚地看见正中

    隆起外层血管壁上的SP-免疫阳性神经纤维束也与前叶吻侧血管壁上的SP-免疫阳性神

    经纤维和后叶血管旁的SP-免疫阳性神经纤维相连续。这些血管壁上的SP-免疫阳性神

    经纤维多局限在正中隆起到垂体吻侧端这一狭窄的范围内。

    5.三叉神经可发出一些SP-免疫阳性神经纤维进入到垂体周围的脑膜中。连续追踪

    观察这些纤维,发现这些SP-免疫阳性神经纤维仅局限于在脑膜中走行,仅有分支达垂
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    体前叶的表浅部位,而不深入到腺体内部。

    图5 颈内动脉海绵窦与垂体位置关系图

    A:垂体尾侧段的冠状切面上,颈内动脉(CA)位于垂体前叶(AP)下方脑膜外,而海绵

    窦(CS)位于前叶的两侧,P为脑桥,BA为基底动脉。图中框出的部位见图6。

    B:垂体中、前段的冠状切面上颈内动脉(CA),位于垂体前叶(AP)两侧、海绵窦(CS)

    包绕着颈内动脉,MB为乳头体。图中框出的部位见图7。

    Fig.5 Diagram of theposition between the carotid arteries(CA), the cavernous sinuses(CS)
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    and the anterior pituitary(AP).

    A: In the frontal section of caudal pituitary the carotidarteries are under the anterior pituitary

    in the outside of the meninges and thecaverous sinuses attach the two sides of the anterior

    pituitary. The squared area is seen inFig.6

    B: In the frontal section of rostal pituitary the carotidarteries attach the two sides of anterior
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    pituitary and are surrounded by thecavernous sinus. The squared area is seen in Fig.7

    图9 正中切面向一侧的连续切片的模式图上,正中隆起(ME)和垂体柄(PS)外层的SP-免

    疫阳性神经纤维可和垂体前叶(AP)和后叶(PP)相连。PC为垂体裂,M为脑膜,V为

    门脉血管

    Fig.9 Connection ofthe SP-immuoreactive nerve fibers in the exteral layer of themedian

    eminence and the pituitary stalk with theanterior pituitary (AP) and the posterior pituitary
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    (PP) in the Camera Lucida drawings ofserial sections near the median section.

    讨 论

    以往在研究垂体前叶实验中,都是单独地将垂体从周围结构中分离出来去研究。

    这样的取材方法必然丧失垂体周围组织中许多有用的信息,尤其是在垂体前叶的神经

    纤维来源以及神经纤维进入垂体的路径不清楚的情况下。而本实验在取材时,保留垂

    体周围组织的完整,包括脑膜和血管的完整,垂体柄与正中隆起、下丘脑的连续,并

    采用连续切片的方法,来研究垂体前叶中SP-免疫阳性神经纤维与其周围组织结构中的
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    SP-免疫阳性神经纤维的关系。

    垂体周围的脑膜组织中有许多SP-免疫阳性神经纤维或纤维束包绕前叶的四周,在

    垂体腹侧呈吻尾方向走行,其来源并不十分明确。三叉神经节富含SP-、CGRP-免疫阳

    性神经元,三叉神经节发出的感觉纤维可分布于脑膜上。在大鼠垂体前叶周围的脑膜

    中也可见到三叉神经节发出的SP-免疫阳性神经纤维。但连续追踪这些神经纤维发现它

    们仅局限于脑膜或垂体前叶的浅表。在垂体前叶神经纤维起源的荧光金逆行追踪研究

    中,我们发现三叉神经节中仅有数个阳性细胞(未发表)。在对三叉神经节的顺行追踪

    中,也只有一些纤维位于脑膜和前叶浅层(未发表)。这同本实验观察到的三叉神节发
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    出的SP-免疫阳性神经纤维仅分布于前叶表面的脑膜或腺体浅表的结果是一致的。

    垂体前叶腹侧面的脑膜上有许多SP-免疫阳性神经纤维束沿吻-尾方向走行,这也

    得到了水平切片结果的支持。这些神经纤维在垂体前叶的某处进入垂体前叶,并分出

    许多终末分布于细胞周围。垂体前叶尾侧端的SP-免疫阳性神经纤维束与其两侧海绵窦

    壁上的SP-免疫阳性神经纤维束相连的事实说明:很可能垂体前叶尾侧的SP-免疫阳性

    神经纤维是由海绵窦壁上的SP-免疫阳性神经纤维束延续而来。同时位于垂体段的海绵

    窦,其血管壁上的SP-免疫阳性神经纤维由尾侧向吻侧逐渐减少。另外,包裹着垂体前
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    叶的脑膜中,有许多从两侧海绵窦发出的穿支小血管,它们沟通垂体前叶两侧的海绵

    窦[9]。然而这些小血管壁上却带有大量的SP-免疫阳性神经纤维束,沿脑膜或向前叶内

    走行。Harris[10]也曾报道大鼠垂体前叶中的神经纤维有的是经海绵窦而来的。这些都

    说明垂体周围脑膜中的一些SP-免疫阳性神经纤维是经海绵窦静脉壁而来,并且可以进

    入大鼠的垂体前叶。

    垂体门脉系统是一类相当复杂的血管网系统[9],大鼠的垂体血供由垂体上、下动脉

    供应,有的还有垂体中动脉[9],这些垂体动脉都源于颈内动脉,它们在正中隆起和垂体
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    柄处吻合于前叶的门静脉血管网。垂体后叶尾侧半的血液经垂体下静脉流入体循环,而

    前半部分血液则流入垂体柄处的门静脉而进入垂体前叶血管网[9]。因此,后叶血管在垂

    体柄、正中隆起处和前叶的血管是相连的。但实验中所发现的,位于正中隆起外层的血

    管壁上的SP-免疫阳性神经纤维束的确切来源,却未见报道。有作者认为下丘脑的SP-免

    疫阳性神经元的轴突可分布于垂体门脉血管周围,其释放的P-物质经门脉血流而作用于

    垂体前叶和后叶[2]。但是本实验中所见到的,分布于垂体门脉血管周围的SP-免疫阳性

    神经纤维是否来源于下丘脑,还需进一步证明。
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    人们认为在垂体前叶中存在有交感和副交感的神经纤维[10,11],它们随血管走行,支配前叶中的血管。其中交感神经纤维发自颈上节,沿颈内动脉至颅内[10,11]。我们在

    逆行追踪前叶的神经纤维起源时亦发现颈上节有阳性标记细胞(待发表)。这与传统上

    认为颈上神经节可发出神经纤维到垂体前叶的结论相一致。但颈上节本身的免疫化学

    性质不足以解释前叶中存在的多种递质(调质)的神经纤维。颈上神经节主要含的递质

    是去甲肾上腺素,虽然颈上神经节的神经元中也含有NPY和SP的mRNA及肽,但正常

    动物颈上神经节中的神经元所含的SP并不是作为一种递质被运送到神经支配的靶区,而是作为一种神经节内的一种调节物[12]。本研究见到颈内动脉在进入颅内时其血管壁
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    上并不具有SP-免疫阳性神经纤维,只是往吻侧走行,颈内动脉进入了脑膜下后,其血

    管壁上才出现了SP-免疫阳性神经纤维。我们认为:颈内动脉垂体段管壁上的SP-免疫

    阳性神经纤维亦很可能来源于其周围脑膜或海绵窦壁,但并不排除其他来源。因此,颈上神经节可能只是垂体前叶神经的起源之一。

    收稿1997-01 修回 1997-04

    本文图1~4,6~8见插图第5页

    图 版 说 明

    图1矢状切面上,正中隆起(ME)腹侧血管(V)壁上和垂体前叶(AP)吻侧的血管(V)壁上的
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    SP-免疫阳性神经纤维束。标尺示200μm

    图2 垂体前叶吻侧端的冠状切面上,横行于垂体前叶中的SP-免疫阳性神经纤维(↑)。

    标尺示200μm

    图3 垂体前叶尾侧端冠状切面上,横行于前叶中的SP-免疫阳性神经纤维(↑)。标尺示

    200μm

    图4 水平切面上,SP-免疫阳性神经纤维束走行于垂体前叶表面,有平行纤维(↑),也

    有不平行纤维(▲)。标尺示200μm

    图6 左右两图为冠状切面上相邻两张切片的相同部位的照片,可见海绵窦壁上的SP-免

, 百拇医药     疫阳性神经纤维(▲)和进入前叶中的神经纤维(↑)。标尺示200μm

    图7 冠状切面上垂体前叶(AP)吻侧段旁的颈内动脉(CA)壁上的SP-免疫阳性神经纤维。

    标尺示100μm

    图8 水平切面上,脑膜内血管(*)壁上的SP-免疫阳性神经纤维(↑)。标尺示100μm

    Explanationof figures

    Fig.1 SP-immunoreactivenerve fibers (↑) along the wall of vessels (V) in theexternal layer

    of median eminence (ME) and in the rostalarea of the anterior pituitary in sagittal section.
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    Bar=200μm

    Fig.2 SP-immunoreactive nerve fibers (↑) in rostal anterior pituitary infrontal section.

    Bar=200μm

    Fig.3 SP-immunoreactive nerve fibers (↑) in caudal anterior pituitary infrontal section.

    Bar=200μm

    Fig.4 The parallel SP-immunoreactive nerve fibers (↑) andnon-parallel nerve fibers (▲) in
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    anterior pituitary in horizontal section.Bar=200μm

    Fig.6 SP-immunoreactive nerve fibers in the wall of cavernoussinus (left picture) and some

    nerve fibers from the wall into theanterior pituitary (right picture). Left and right pictures

    are adjacent sections. Bar=200μm

    Fig.7 SP-immunoreactive nerve fibers in the wall of the carotidartery in the frontal section
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    of rostal pituitary. Bar=100μm

    Fig.8 SP-immunoreactive nerve fibers along the small vessel(*) inthe meninges around the

    anterior pituitary in horizortal section.Bar=100μm

    参 考 文 献

    [1] Ju G, Liu SJ.Substance P-immunoreactive nerve fibers in the pars distalis ofthe anterior

    pituitary of macques. J Chem Neuroanat,1989, 2(6):349
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    oftherat:demonstration of immunoreactivefibers and specific binding sites. Neuroendocr-

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    [3] Con G, Giaid A, Stell JH, et al.Localization of immunoreactivity for calcitonin gene-rel-

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    fibers with gland cells of the anteriorpituitary in the rat. Cell Tissue Res,1996,285(2):227

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    physiology. New York: The New York Academyof Sciences, 1991:10-18

    RELATIONSHIPBETWEEN THE SP-IMMUNOREACTIVE

    NERVE FIBERS IN THE ANTERIOR PITUITARY AND
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    THE NERVE FIBERS IN STRUCTURES SURROUNDING

    THE ANTERIOR PITUITARY IN THE RAT

    WangJian, Ju Gong

    (Department ofNeuromorphology, Institute of Neurosciences, The Fourth MilitaryMedical University, Xi′an)

    The relatinship between theSP-immunoreactive nerve fibers in the anterior pituitary and

    in the structures surrounding the pituitary of rat was studied indetail by preserving the struct-
, 百拇医药
    ures of the immediate vicinity of the anterior pituitary andthrough serial sectioning. There

    were a considerable amount of SP-immunoreactive nerve fiberbundles between the surface

    of the pituitary and the meninges. In some places these nervefiber bundles entered the anterior

    pituitary and arborized into groups of terminal fibers.Furthermore, many SP-immunoreactive
, 百拇医药
    nerve fiber bundles could be seen along the walls of thecavernous sinus and carotid artery

    incontinuity with the nerve fibers on the surface of the anteriorpituitary. In addition, there were

    a large number of SP-immunoreactive nerve fibers along the wallsof the vessels at the pituitary

    stalk. They were continued to the nerve fibers in the neural lobeand in the rostal part of the

    anterior pituitary.

     KEY WORDS Pituiary; Anteriorpituitary; Innervation; Substance P; Rat

    _____________________

    △Institute of Neurosciences, The FourthMilitary Medical University, Xi′an 710032,China, 百拇医药


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